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生物緩衝液的主要分類及優缺點說明
  產品分類:
 
  1. 磷酸鹽緩衝液
 
  磷酸鹽緩衝液是應用廣泛的生物緩衝液。由於其二次離解作用,緩衝液pH值範圍較寬,可配置不同pH值的酸性、堿性和中性緩衝液:
 
  製備酸性緩衝液可直接使用NaH2PO4或KH2PO4, pH值範圍為1~5;
 
  堿性緩衝液可直接使用Na2HPO4或K2HPO4, pH範圍為9~12;
 
  中性緩衝液中含有等量的NaH2PO4和Na2HPO4或等量的KH2PO4和K2HPO4溶液,pH值為5.5~8.5。
 
  優點:①易於配製成各種濃度 ;②pH值範圍寬;③pH受溫度的影響小;
 
  缺點:①易與常見的鈣、鎂、重金屬離子形成沉澱;②抑製某些生化過程;
 
  2. Tris緩衝液
 
  Tris緩衝液在生物化學研究中有著廣泛的應用。它是弱堿,通常在“中性”範圍內使用。Tris-HCl緩衝:pH = 7.5 ~ 8.5;三磷酸緩衝液:pH = 5.0 ~ 9.0。
 
  除TRIS - hcl外,TRIS還有多種衍生化緩衝:
 
  TBS=Tris-HCl+ NaCl+KCl,常用來清洗免疫染色組織或Western blotting中的Western blotting膜;
 
  TBST=Tris-HCl+NaCl+tween20,一種常用於Western Blotting的膜緩衝液;
 
  TE=Tris-HCl+EDTA,對DNA堿基具有保護作用,常用於DNA的穩定和儲存;
 
  TAE=Tris堿+乙酸+EDTA,是一種廣泛應用於短片段DNA電泳的緩衝體係;
 
  TBE=三堿基+硼酸+EDTA,適用於長期DNA電泳,對小片段有較好的分離效果。
 
  優點: ①因為Tris堿的堿性較強,所以可以隻用這一種緩衝體係配製pH範圍由酸性到堿性的大範圍pH值的緩衝液;②對生物化學過程幹擾很小,不與鈣、鎂離子及重金屬離子發生沉澱。
 
  缺點:①緩衝液的pH值受溶液濃度影響較大,緩衝液稀釋十倍,pH值的變化大於0.1;②溫度效應大,溫度變化對緩衝液pH值的影響很大,所以一定要在使用溫度下進行配製,室溫下配製的Tris-HCl緩衝液不能用於0℃~4℃。 ③易吸收空氣中的CO2,所以配製的緩衝液要蓋嚴密封。④此緩衝液對某些pH電極發生一定的幹擾作用,所以要使用與Tris溶液具有兼容性的電極。
 
  3. Good’s緩衝液
 
  在 1960 年代中期,N.E.Good鑒於一般的緩衝液係統並不適合生化實驗所使用,必須用人為設計和人工合成的方法來找到專門用於生命科學研究的特定的緩衝體係,這些緩衝體係們都具有以下特質:
 
  1.pKa 在6~8 之間;2.在水溶液中有高溶解度;3.鹽效應很小;4.不易被運送通過細胞膜;5.不易受溫度、離子組成、濃度等因素影響解離度;6.不會與金屬離子形成錯合物,或錯合物不沉澱、不幹擾生物活性;7.化學性質穩定。
 
  Good’s緩衝液的主要優點是不參加和不幹擾生物化學反應過程,對酶化學反應等無抑製作用,所以它們專門用於細胞器和極易變性的、對pH敏感的蛋白質和酶的研究工作。
 
  其缺點是:①價格昂貴,②對測定蛋白質含量的雙縮脲法和Lowry法不適用,因為它們會使空白管的顏色加深。
 
  4.甘氨酸緩衝液
 
  甘氨酸緩衝液pH值範圍廣,應用範圍廣。pH值範圍為2.0~11.0。

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