產品名稱:10000*SolarRed 核酸染料
產品型號:G5560-0.5ml
產品特點:10000*SolarRed 核酸染料是一種靈敏、穩定和相對安全的熒光核酸染色試劑。它可以替代高毒性染色劑-溴化乙錠(EB),用於瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠中dsDNA和ssDNA的染色。SolarRed的靈敏度遠高於EB,並且不需要脫色。由於SolarRed和EB有相同的光譜特性,因此用它替代EB時不需要更換成像係統。
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10000*SolarRed 核酸染料是一種靈敏、穩定和相對安全的熒光核酸染色試劑。它可以替代高毒性染色劑-溴化乙錠(EB),用於瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠中dsDNA和ssDNA的染色。SolarRed的靈敏度遠高於EB,並且不需要脫色。由於SolarRed和EB有相同的光譜特性,因此用它替代EB時不需要更換成像係統。
10000*SolarRed 核酸染料既可用於預製凝膠也可用於電泳後染色。通常電泳後染色的靈敏度更高,並能排除染料對DNA遷移的幹擾。使用SolarRed進行電泳後染色,操作簡單不需要脫色和特殊溶液。隻要將染料稀釋在0.1M NaCl中,並將凝膠置於染色液中,30分鍾後就可以觀察。染色液在室溫下極為穩定,可以多次反複使用。相比而言,預製凝膠由於不需要額外染色過程,因此染料用量更少,更為簡單經濟。
除了的靈敏度和穩定性外,獨立實驗室的毒性測試也顯示,在凝膠染色的濃度下,SolarRed沒有誘變性和細胞毒性。SolarRed安全性的關鍵在於它對於細胞膜完全沒有通透性。
特點:
1、無毒性:SolarRed獨特的油性和大分子量特點使其不能穿透細胞膜進入細胞內,艾姆斯氏試驗結果也表明,該染料的誘變性遠遠小於EB。
2、靈敏度高:適用於各種大小片段的電泳染色,對核酸遷移的影響小於SYBR Green I。
3、穩定性高: 適用於使用微波或其它加熱方法製備瓊脂糖凝膠;室溫下在酸或堿緩衝液中極其穩定,耐光性強。
4、信噪比高:樣品熒光信號強,背景信號低。
5、操作簡單:與 EB 一樣,在預製膠和電泳過程中染料不降解;而電泳後染色過程也隻需30 分鍾且無需脫色或衝洗 ,即可直接用紫外凝膠透射儀觀察。
6、適用範圍廣:可選擇電泳前染色(膠染法)或電泳後染色(泡染法);適用於瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳;可用於 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。
與EB有相同的光譜特性,無需改變濾光片及觀察裝置:標準的 EB 濾光片或 SYBR 濾光片都適用,使用與觀察EB相同的普通紫外凝膠透射儀觀察即可。但是SolarRed不能被488 nm氬離子激光器或相似波長的可見光完全激發,因此不推薦使用此類激發裝置的成像係統。對於此類裝置,茄子视频官网地址入口推薦您使用gelred (Cat# G5560),它和SYBR Green I 的光譜相似,靈敏度相當,但更加穩定。
SolarRed 使用方法簡介
1.膠染法(用法同EB)(推薦方法)
(1) 製膠時加入SolarRed核酸染料(例如:每50mL 瓊脂糖溶液中加入5μL SolarRed 10,000× 儲液,
以此比例類推)。
(2) 按照常規方法進行電泳。
注意事項:
(1) 此方法染色染料用量相對較少。500 μL染料大約可以做100塊 50mL的膠。
(2) 由於SolarRed具有良好的熱穩定性,可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷卻。搖晃,振蕩或者翻轉以保證染料充分混勻。也可以選擇將SolarRed儲液加到瓊脂糖粉末和電泳緩衝液中,然後用微波爐或其他常用方式加熱以製備瓊脂糖凝膠。SolarRed兼容幾乎所有常用的電泳緩衝溶液。
(3) 如果總是看到條帶彌散或分離不理想,建議使用泡染法染色以確認問題是否與染料有關。如果染色後問題依舊存在,則說明問題與染料無關,請嚐試:降低瓊脂糖濃度;選用更長的凝膠;延長凝膠時間以保證邊緣清晰;改進上樣技巧或選擇泡染法染色。
(4) 此方法不適合預製聚丙烯酰胺凝膠,對於聚丙烯酰胺凝膠請使用泡染法。
2.泡染法
(1) 按照常規方法進行電泳。
(2) 用H2O將SolarRed 10,000× 儲液稀釋約3,300倍到0.1M NaCl中,製成3× 染色液。(例如將15μL SolarRed 10,000× 儲液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。
(3) 將凝膠小心地放入合適的容器中,如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的3× 染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色30min左右,染色時間根據凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對於含3.5~10%丙烯酰胺的凝膠,染色時間通常介於30min到1h,並隨丙烯酰胺含量增加而延長。
注意事項:
(1) 用泡染法染色時,染料用量較多。單次使用的染色液可重複使用3次左右。
(2) 3×SolarRed染色液可以大量製備,在室溫下避光保存直用完。
特別提醒:
(1) 如果您使用的是紫外成像儀,請選擇SolarRed ;如果您使用激光成像儀或希望在可見光下觀測,請選擇SolarRed。
(2) 在極少數情況下,質粒經某些酶切後的DNA樣品會出現拖尾和分辨率降低,此時建議同時嚐試兩種染色方法以決定哪種方法更加合適。
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