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產品名稱:甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒

產品型號:BC0625

產品報價:

產品特點:甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒
測定意義:TG是長鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不僅是細胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。
測定原理:用異丙醇抽提取TG,KOH皂化TG後水解生成甘油及脂肪酸,過碘酸氧化甘油生成甲醛,在氯離子存在下甲醛與乙酰丙酮縮合生成黃色物質,在420 nm有特征吸收峰,其顏色的深淺與TG含量成正比。

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BC0625甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒的詳細資料:

甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒

操作步驟:

一、 TG 的提取:

1、 組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿,8000g,4℃離心10min,取上清待測。

2、 細胞、細菌:先收集 400-500 萬細胞或細菌到離心管內,棄上清,加 1mL 試劑一,超聲波破碎 1min(強度 20%,超聲 2s,停 1s),8000g, 4℃離心 10min,取上清待測。

3、 血清(漿)等液體樣品:直接測定。

二、 測定操作:

1. 分光光度計預熱 30min,調節波長到 420 nm,蒸餾水調零。

2. 水浴鍋預熱到 65℃。空白管 標準管 測定管雙蒸水(μL) 40 標準液(μL) 40 TG 待測液(μL) 40 試劑一(μL) 125 125 125 試劑二(μL) 25 25 25 加試劑一後充分混勻,再加試劑二,劇烈振蕩 30s,靜置,待分層後取上層溶液 30μL,置於新的 EP 管中。

3.甘油三酯含量測定:空白管 標準管 測定管上層溶液(μL) 30 30 30 試劑三 (μL) 100 100 100 試劑四(μL) 30 30 30 充分混勻,65℃水浴 3min 試劑五(μL) 100 100 100 試劑六(μL) 100 100 100 充分混勻,65℃水浴 15min 取出 200μL 於微量石英比色皿/96 孔板測定 420nm 處吸光度,記為 A 空,A 標和 A 測。注意:空白管和標準管隻需測定一次。

甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒

a.使用微量石英比色皿測定的計算公式如下

1. 血清(漿)中甘油三酯含量: TG 含量(mg/dL)=C 標準品×(A 測-A 空)÷(A 標-A 空)×100 mL =100×(A 測-A 空)÷(A 標-A 空) C 標準品:1mg/mL;100mL:血清體積,1dL=100 mL。

2. 組織中甘油三酯含量: (1)按樣本蛋白濃度計算 TG 含量(mg/ mg prot)= C 標準品×(A 測-A 空)÷(A 標-A 空)÷Cpr =(A 測-A 空)÷(A 標-A 空)÷ Cpr (2)按樣本質量計算 TG 含量(mg/ g)=C 標準品×(A 測-A 空)÷(A 標-A 空)÷W =(A 測-A 空)÷(A 標-A 空)÷ W C 標準品:1mg/mL ;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g/mL

3. 細胞、細菌中甘油三酯含量: TG 含量(mg/104 cell)=C 標準品×(A 測-A 空)÷(A 標-A 空)÷細菌或細胞(104 cell /mL) =(A 測-A 空)÷(A 標-A 空)÷細菌或細胞(104 cell /mL) C 標準品:1mg/mL。

b.使用 96 孔板測定的計算公式如下

1. 血清(漿)中甘油三酯含量: TG 含量(mg/dL)=C 標準品×(A 測-A 空)÷(A 標-A 空)×100 mL =100×(A 測-A 空)÷(A 標-A 空) C 標準品:1mg/mL;100mL:血清體積,1dL=100 mL。

2. 組織中甘油三酯含量: (1)按樣本蛋白濃度計算 TG 含量(mg/ mg prot)= C 標準品×(A 測-A 空)÷(A 標-A 空)÷Cpr =(A 測-A 空)÷(A 標-A 空)÷ Cpr (2)按樣本質量計算 TG 含量(mg/ g)=C 標準品×(A 測-A 空)÷(A 標-A 空)÷W =(A 測-A 空)÷(A 標-A 空)÷ W C 標準品:1mg/mL ;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g/mL

3. 細胞、細菌中甘油三酯含量: TG 含量(mg/104 cell)=C 標準品×(A 測-A 空)÷(A 標-A 空)÷細菌或細胞(104 cell /mL) =(A 測-A 空)÷(A 標-A 空)÷細菌或細胞(104 cell /mL) C 標準品:1mg/mL。

注意事項:

1. 試劑盒中有易揮發性物質,實驗過程中需佩戴手套和口罩,試劑瓶蓋打開後應該及時蓋緊。

2. 加試劑二後需劇烈震蕩,使待測液中甘油三酯得到充分提取。

3. 檢出限為 100μ mol/L。

試劑一:自備,取玻璃空瓶,加入 45mL 正庚烷,80mL 異丙醇,蓋緊後混勻,4℃保存。

劑二:液體 3mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 10mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑五:液體 10mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑六:液體 10mL×1 瓶,4℃避光保存。標準品:液體 5mL×1 瓶,1mg/mL 甘油三酯標準溶液,4℃保存。

相關文獻:

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《Strontium ranelate-induced anti-adipocytic effects are involved in negative regulation of autophagy in rat bone marrow mesenchymal stem cells》 作者:Zhenbin Xu,Xizhuang Bai 期刊:International Orthopaedics 影響因子:2.384 PMID:29717341
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